scbmtБИОМЕДИЦИНАJournal Biomed2074-59822713-0428Scientific center of biomedical technologies of Federal Medical and Biological Agency10.33647/2713-0428-17-3E-14-16scbmt-1304Research ArticleМЕТОДЫ И ТЕХНОЛОГИИ БИОМЕДИЦИНСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙMETHODS AND TECHNOLOGIES OF BIOMEDICAL RESEARCHМетодические аспекты получения и характеризации липополисахаридов из клеточной культуры Escherichia coliMethodical aspects of lipopolysaccharides obtaining and characterization from Escherichia coli cellsАгельдиновА. И.AgeldinovR. A.

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

ageldinov@gmail.comЛевашоваА. И.LevashovaA. I.

к.х.н., 

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Cand. Sci. (Chem.), 

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

annalevashova3@gmail.comКоханВ. С.KokhanV. S.

к.б.н., 

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Cand. Sci. (Biol.),

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

viktor_kohan@hotmail.comНестеровМ. С.NesterovM. S.

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

mdulya@gmail.comФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий ФМБА России»РоссияScientific Center of Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency of RussiaRussian Federation202121102021173E1416Copyright © Агельдинов А.И., Левашова А.И., Кохан В.С., Нестеров М.С., 20212021Агельдинов А.И., Левашова А.И., Кохан В.С., Нестеров М.С.Ageldinov R.A., Levashova A.I., Kokhan V.S., Nesterov M.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.scbmt.ru/jour/article/view/1304

В данном исследовании была применена процедура очистки липополисахаридов из Escherichia coli на основе протокола горячей фенольной экстракции. Чистоту экстрагированных липополисахаридов оценивали методом ВЭЖХ-УФ. Пирогенную активность определяли с помощью Limulus Amebocyte Lysate-теста и использовали для мониторинга функциональности очищенных липополисахаридов. ВЭЖХ-анализ показал высокую степень чистоты, сравнимую с коммерческим липополисахаридом. Пирогенная активность подтверждала функциональную активность очищенных липополисахаридов. Представленный протокол может быть использован для выделения липополисахаридов с высокой чистотой и функциональной активностью. 

In this study, a procedure was applied to purify lipopolysaccharides from Escherichia coli based on a hot phenolic extraction protocol. The purity of the extracted lipopolysaccharides was assessed by HPLC-UV. Pyrogenic activity was determined using the Limulus Amebocyte Lysate test and used to monitor the functionality of the purified lipopolysaccharides. HPLC analysis showed a high degree of purity comparable to commercial lipopolysaccharide. Pyrogenic activity confirmed the functional activity of purified lipopolysaccharides. The presented protocol can be used to isolate lipopolysaccharides with high purity and functional activity. 

Escherichia coliэндотоксинэкстракциялипополисахаридочисткаEscherichia coliendotoxinextractionlipopolysaccharidepurificationReferencesErridge C., Bennett-Guerrero E., Poxton I.R. Structure and function of lipopolysaccharides. Microbes Infect. 2002;4(8):837–851. DOI: 10.1016/s1286-4579(02)01604-0.Erridge C., Bennett-Guerrero E., Poxton I.R. Structure and function of lipopolysaccharides. Microbes Infect. 2002;4(8):837–851. DOI: 10.1016/s1286-4579(02)01604-0.Rezania S., Amirmozaffari N., Tabarraei B., et al. Extraction, purification and characterization of lipopolysaccharide from Escherichia coli and Salmonella typhi. Avicenna J. Med. Biotechnol. 2011;3(1):3–9.Rezania S., Amirmozaffari N., Tabarraei B., et al. Extraction, purification and characterization of lipopolysaccharide from Escherichia coli and Salmonella typhi. Avicenna J. Med. Biotechnol. 2011;3(1):3–9.Rietschel E.T., Brade H. Bacterial endotoxins. Sci. Am. 1992;267(2):54–61.Rietschel E.T., Brade H. Bacterial endotoxins. Sci. Am. 1992;267(2):54–61.Westphal O., Jann K. Bacterial lipopolysaccharides. Extraction with phenol-water and further applications of the procedure. In: Whistler R.L., Wolfan M.L., et al. Methods in carbohydrate chemistry. New York: Academic press, 1965:83–91.Westphal O., Jann K. Bacterial lipopolysaccharides. Extraction with phenol-water and further applications of the procedure. In: Whistler R.L., Wolfan M.L., et al. Methods in carbohydrate chemistry. New York: Academic press, 1965:83–91.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.