scbmtБИОМЕДИЦИНАJournal Biomed2074-59822713-0428Scientific center of biomedical technologies of Federal Medical and Biological Agency10.33647/2074-5982-19-1-8-21scbmt-1453Research ArticleМЕТОДЫ И ТЕХНОЛОГИИ БИОМЕДИЦИНСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙMETHODS AND TECHNOLOGIES OF BIOMEDICAL RESEARCHОпытно-промышленная технология получения субстанции стабилизированных в липидах устойчивых наночастиц, содержащих комплекс биологически активных веществ, выделенных из мускуса кабарги, с заданными параметрами стабильностиPilot-Scale Technology for Obtaining a Substance of Lipid-Stabilized Nanoparticles Containing a Complex of Biologically Active Substances Isolated from Gland Secretion of Musk Deer with Specified Stability ParametersЛюблинскийС. Л.LyublinskiyS. L.

Люблинский Станислав Людвигович, к.б.н.

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Stanislav L. Lyublinskiy, Cand. Sci. (Biol.)

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

ЛюблинскаяИ. Н.LyublinskayaI. N.

Люблинская Ирина Николаевна

249010, Калужская область, Боровск, п. Институт, 6

Irina N. Lyublinskaya

249010,  Kaluga Region, Borovsk, Institute Village, 6

mobitek-m@mail.ruКолосковаЕ. М.KoloskovaE. M.

Колоскова Елена Михайловна, к.б.н.

249010, Калужская область, Боровск, п. Институт, 6

Elena M. Koloskova, Cand. Sci. (Biol.)

249010,  Kaluga Region, Borovsk, Institute Village, 6

КеремецкаяЛ. Ф.KeremetskayaL. F.

Керемецкая Лариса Фёдоровна

249010, Калужская область, Боровск, п. Институт, 6

Larisa F. Keremetskaya

249010,  Kaluga Region, Borovsk, Institute Village, 6

АзизовА. М.AzizovA. M.

Азизов Ариф Мурсали Оглы

249010, Калужская область, Боровск, п. Институт, 6

Arif M. Azizov

249010,  Kaluga Region, Borovsk, Institute Village, 6

КаркищенкоВ. Н.KarkischenkoV. N.

Каркищенко Владислав Николаевич, д.м.н., проф.

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Vladislav N. Karkischenko, Dr. Sci. (Med.), Prof.

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

НестеровМ. С.NesterovM. S.

Нестеров Максим Сергеевич

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Maksim S. Nesterov

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

КапцовА. В.KaptsovA. V.

Капцов Александр Владимирович

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Alexander V. Kaptsov

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

ШарабановА. В.SharabanovA. V.

Шарабанов Андрей Вячеславович

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Andrey V. Sharabanov

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

АгельдиновР. А.AgeldinovR. A.

Агельдинов Руслан Андреевич

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы; 1125047, Москва, Миусская пл., 9

Ruslan A. Ageldinov

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1;  125047, Moscow, Miusskaya Square, 9

ГерасимовВ. Н.GerasimovV. N.

Герасимов Владимир Николаевич, д.б.н.

142279,  Московская обл., Серпуховский р-н, п. Оболенск

Vladimir N. Gerasimov, Dr. Sci. (Biol.)

142279, Moscow Region, Serpukhov District, Obolensk Village

ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий ФМБА России»РоссияScientific Center of Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency of RussiaRussian FederationООО «Научно-производственная фирма “МОБИТЕК-М”»РоссияScientific-Production Firm “MOBITEK-M”Russian FederationФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий ФМБА России»; ФГБОУ ВО «Российский химико-технологический университет имени Д.И. Менделеева»РоссияScientific Center of Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency of Russia; D.I. Mendeleev Russian Chemical Technology UniversityRussian FederationФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии»РоссияState Research Center for Applied Microbiology and BiotechnologyRussian Federation202307042023191821Copyright © Люблинский С.Л., Люблинская И.Н., Колоскова Е.М., Керемецкая Л.Ф., Азизов А.М., Каркищенко В.Н., Нестеров М.С., Капцов А.В., Шарабанов А.В., Агельдинов Р.А., Герасимов В.Н., 20232023Люблинский С.Л., Люблинская И.Н., Колоскова Е.М., Керемецкая Л.Ф., Азизов А.М., Каркищенко В.Н., Нестеров М.С., Капцов А.В., Шарабанов А.В., Агельдинов Р.А., Герасимов В.Н.Lyublinskiy S.L., Lyublinskaya I.N., Koloskova E.M., Keremetskaya L.F., Azizov A.M., Karkischenko V.N., Nesterov M.S., Kaptsov A.V., Sharabanov A.V., Ageldinov R.A., Gerasimov V.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.scbmt.ru/jour/article/view/1453

В ходе усовершенствования опытно-промышленной технологии производства липосомированной субстанции биологически активных веществ (БАВ) из мускуса кабарги установлены режимы, обеспечивающие получение липосом в соответствии с правилами GMP с заданными параметрами стабильности (форма, гидродинамический диаметр, заряд, индекс полидисперсности) и максимальное включение БАВ из мускуса кабарги в липосомы с сохранением исходной биологической активности важнейших его компонентов, а также в два раза сокращающие продолжительность технологического цикла производства субстанции с выходом конечного продукта более 90%. Усовершенствованная технология обеспечивает получение не менее 80% липосом с оптимальным для трансмукозального способа доставки лекарственных веществ размером основной фракции липосом в опытных образцах в диапазоне 200±50 нм — для конечной субстанции (до лиофилизации), и 250±100 нм — после её восстановления (регидратации), индексом полидисперсности менее 0,3 и дзета-потенциалом — менее –35 мВ.

Показатели качества, характеризующие дисперсность полученной липосомальной субстанции, исследованы соответствующими методами анализа (динамическое светорассеяние, электронная микроскопия). На основании полученных результатов доработан проект спецификации на липосомальную субстанцию (порошок), содержащую комплекс БАВ, выделенных из мускуса кабарги.

In the course of improving the pilot-scale technology for manufacturing a liposomal substance of biologically active substances (BAS) isolated from the gland secretion of musk deer, the authors established operations and modes to ensure the production of liposomes with the specified stability parameters (shape, hydrodynamic diameter, charge, and polydispersity index) in full compliance with GMP requirements and the maximum inclusion of BAS from deer musk into liposomes with the preservation of the initial biological activity of its most important components. The established modes provide for a two-fold reduction in the technological cycle duration with the substance yield of more than 90%. The improved technology ensures the production of at least 80% of liposomes with the main liposome fraction in experimental samples in the range of 200+50 nm and 250+100 nm for the final substance (before lyophilization) and after its recovery (rehydration), respectively, which is considered optimal for transmucosal drug administration. The polydispersity index was less than 0.3, and the zeta (Z)-potential was less than -35 mV. The quality indicators characterizing the dispersity of the resulting liposomal substance were studied by conventional analytical methods (dynamic light scattering, electron microscopy). On the basis of the obtained results, a draft specification for a liposomal substance (powder) containing a complex of BAS isolated from deer musk was finalized.

кабаргамускуслипосомыгомогенизатор высокого давленияmusk deermuskliposomeshigh pressure homogenizerReferencesАршинова О.Ю., Санарова Е.В., Ланцова А.В., Оборотова Н.А. Особенности лиофилизации липосомальных лекарственных препаратов (обзор). Химико-фармацевтический журнал. 2012;46(4):29– 34.Arshinova O.Yu., Sanarova Ye.V., Lantsova A.V., Oborotova N.A. Osobennosti liofilizatsii liposomal’nykh lekarstvennykh preparatov (obzor) [Features of lyophilization of liposomal drugs (review)]. KhimikoFarmatsevticheskii Zhurnal [Chemical-Pharmaceutical Journal]. 2012;46(4):29–34. (In Russian).Каркищенко В.Н., Дуля М.С., Хвостов Д.В., Агельдинов Р.А., Люблинский С.Л. Протеомный анализ в идентификации белковых компонентов препуциальной железы кабарги сибирской. Биомедицина. 2019;15(1):35–47. DOI: 10.33647/2074-5982-15-1-35-47.Karkischenko V.N., Dulya M.S., Khvostov D.V., Ageldinov R.A., Lyublinskiy S.L. Proteomnyy analiz v identifikatsii belkovykh komponentov preputsial’noy zhelezy kabargi sibirskoy [Proteomic analysis in the identification of active components in the preputial gland secretion of the Siberian musk deer]. Biomeditsina [Journal Biomed]. 2019;15(1):35–47. (In Russian). DOI: 10.33647/2074-5982-15-1-35-47.Краснопольский Ю.М., Степанов А.Е., Швец В.И. Технологические аспекты получения липосомальных препаратов в условиях GMP. Биофармацевтический журнал. 2009;1(3):18–29.Krasnopol’skiy Yu.M., Stepanov A.Ye., Shvets V.I. Tekhnologicheskiye aspekty polucheniya liposomal’nykh preparatov v usloviyakh GMP [Technological aspects of obtaining liposomal preparations under GMP conditions]. Biofarmatsevticheskiy zhurnal [Russian Journal of Biopharmaceuticals. 2009;1(3):18-29. (In Russian)].Люблинский С.Л., Люблинская И.Н., Колоскова Е.Н., Азизов А.М., Каркищенко В.Н., Нестеров М.С., Капцов А.В., Агельдинов Р.А., Герасимов В.Н., Гриненко Д.В. Технологические аспекты получения субстанции стабилизированных в липидах устойчивых наночастиц, содержащих комплекс биологически активных веществ, выделенных из мускуса кабарги. Биомедицина. 2021;17(4):18–37. DOI: 10.33647/2074-5982-17-4-18-37.Lyublinskiy S.L., Lyublinskaya I.N., Koloskova E.N., Azizov A.M., Karkishchenko V.N., Nesterov M.S., Kaptsov A.V., Agel’dinov R.A., Gerasimov V.N., Grinenko D.V. Tekhnologicheskiye aspekty polucheniya substantsii stabilizirovannykh v lipidakh ustoychivykh nanochastits, soderzhashchikh kompleks biologicheski aktivnykh veshchestv, vydelennykh iz muskusa kabargi [Technological aspects of obtaining liposomes containing of a complex of biologically active substances isolated from deer musk]. Biomeditsina [Journal Biomed]. 2021;17(4):18–37. (In Russian). DOI: 10.33647/2074-5982-17-4-18-37.ТУ 01.49.24-001-58709973-2017. Биологически активная добавка к пище «Концентрат мускуса кабарги».ТU 01.49.24-001-58709973-2017. Biologicheski aktivnaya dobavka k pishche «Kontsentrat muskusa kabargi» [Biologically active food supplement “Musk deer concentrate”]. (In Russian).ТУ 10.89.19-001-43217402-2020. Фосфатидилхолин эссенциальный.ТU 10.89.19-001-43217402-2020. Fosfatidilkholin essentsial’nyy [Phosphatidylcholine essential]. (In Russian).Швец В.И., Краснопольский Ю.М., Сорокоумова Г.М. Липосомальные формы лекарственных препаратов: технологические особенности получения и применение в клинике. М.: Ремедиум; 2016:197.Shvets V.I., Krasnopol’skiy Yu.M. Soroko-umova G.M. Liposomal’nyye formy lekarstvennykh preparatov: tekhnologicheskiye osobennosti polucheniya i primeneniye v klinike [Liposomal forms of medicinal preparations: technological features of production and clinical application]. Moscow: Remedium Publ.; 2016:197. (In Russian).Шестаков Н.В., Лосенкова С.О., Закалюкина Е.В., Степанова Э.Ф. Ассортимент и характеристики трансмукозальных лекарственных форм. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2017;(2):96– 101.Shestakov N.V., Losenkova S.O., Zakalyukina E.V., Stepanova E.F. Assortiment i kharakteristiki transmukozal’nykh lekarstvennykh form [Range and characteristics of transmucosal dosage forms]. Razrabotka i registratsiya lekarstvennykh sredstv [Drug development & registration]. 2017;(2):96–101. (In Russian).Kaptsov V.V. Production PPC Bubmicron emulsions and liposomes with high pressure homogenizer «Donor-1». Art. Cells Blood Subs. Immob. Biotech. 1994;22(5):A110.Kaptsov V.V. Production PPC Bubmicron emulsions and liposomes with high pressure homogenizer «Donor-1». Art. Cells Blood Subs. Immob. Biotech. 1994;22(5):A110.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.