scbmtБИОМЕДИЦИНАJournal Biomed2074-59822713-0428Scientific center of biomedical technologies of Federal Medical and Biological Agency10.33647/2074-5982-20-2-45-52scbmt-1583Research ArticleТРАНСГЕНОЗ И ГУМАНИЗИРОВАННЫЕ ЖИВОТНЫЕTRANGENOSIS AND HUMANIZED ANIMALSИзучение иммунного ответа у транс-генных гуманизированных мышей линии HLA-A*02:01 на введение антигена — IgG лошадиImmune Response in HLA-A*02:01 Transgenic Humanized Mice to the Introduction of Horse IgG AntigenКаркищенкоВ. Н.KarkischenkoV. N.

Каркищенко Владислав Николаевич,  д.м.н., проф.

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Vladislav N. Karkischenko,  Dr. Sci. (Med.), Prof.

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

scbmt@yandex.ruБерзинаА. Г.BerzinaA. G.

Берзина  Ася  Григорьевна,  к.б.н.

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Asya G. Berzina, Cand.  Sci.  (Biol.)

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

berzina07@mail.ruПомыткинИ. А.PomytkinI. A.

Помыткин Игорь Анатольевич, к.х.н.

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Igor A. Pomytkin, Cand. Sci. (Chem.)

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

ipomytkin@mail.ruГлотоваЕ. С.GlotovaE. S.

Глотова Елена Сергеевна

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Elena S. Glotova

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

savelaine@gmail.comСавинаМ. А.SavinaM. A.

Савина Мария Анатольевна

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Maria A. Savina

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

graff22@mail.ruПетровД. В.PetrovD. V.

Петров Дмитрий Валерьевич

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Dmitry V. Petrov

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

1941-65@mail.ruТабояковаЛ. А.TaboyakovaL. A.

Табоякова  Лидия  Александровна

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Lidiya A. Taboyakova

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

lida-vet@mail.ruБолотскихЛ. А.BolotskihL. А.

Болотских  Любовь  Александровна, к.с.х.н.

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Lubov’  A.  Bolotskih, Cand.  Sci.  (Agricult.)

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

lyuba.bolotskikh@mail.ruВасильеваИ. А.Vasil’evaI. A.

Васильева Ирина Андреевна

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1

Irina A. Vasil’eva

143442, Moscow Region, Krasnogorsk District, Svetlye Gory Village, 1

rozhstul@mail.ruФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий ФМБА России»РоссияScientific Center of Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency of RussiaRussian Federation20242307202420245--52Copyright © Каркищенко В.Н., Берзина А.Г., Помыткин И.А., Глотова Е.С., Савина М.А., Петров Д.В., Табоякова Л.А., Болотских Л.А., Васильева И.А., 20242024Каркищенко В.Н., Берзина А.Г., Помыткин И.А., Глотова Е.С., Савина М.А., Петров Д.В., Табоякова Л.А., Болотских Л.А., Васильева И.А.Karkischenko V.N., Berzina A.G., Pomytkin I.A., Glotova E.S., Savina M.A., Petrov D.V., Taboyakova L.A., Bolotskih L.А., Vasil’eva I.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.scbmt.ru/jour/article/view/1583

Введение трансгена может иметь негативное влияние на функционирование жизненно важных систем организма биомодели. Нами был проведён сравнительный анализ иммунного ответа мышей гуманизированной трансгенной линии HLA-A*02:01 и мышей, нокаутных по гену β2-микроглобулина мыши, полученных в НЦБМТ ФМБА России, в сравнении с мышами дикого типа в ответ на введение антигена — иммуноглобулина лошади. У животных линии HLA-A*02:01 и мышей дикого типа был получен максимальный иммунный ответ, который был достигнут на 30-й день от начала иммунизации. Титры антител у данных групп резко увеличились и стали близки — 1:8000000   и 1:4000000 соответственно — это показывает, что модификация генома у трансгенных гуманизированных мышей линии HLA-A*02:01 не повлияла на функционирование иммунной системы. У  мышей, нокаутных по гену β2-микроглобулина мыши, подобной динамики увеличения титров антител не наблюдалось. На 7-й день титр антител в этой группе увеличился до значения 1:400   и  к  30-му  дню  составил  1:6400.  Слабый  иммунный  ответ  у  мышей  с  нокаутом  по  гену  β2-микроглобулина мыши подтверждает неоспоримо важную роль этого белка в формировании иммунного ответа.

The introduction of a transgene can impact negatively the functioning of vital systems in biomodels. We  carried out a comparative analysis of the immune response of mice of the HLA-A*02:01 humanized transgenic line, mice with mouse β2-microglobulin gene knockout, and wild-type mice to the introduction of horse immunoglobulin as an antigen. The biomodel lines were created at the Scientific Center of Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency of Russia. The maximum immune response was achieved on the 30th day from the onset of immunization in animals of the HLA-A*02:01 line and wild-type mice. Antibody titers in these groups increased sharply and approached 1:8,000,000 and 1:4,000,000, respectively. This indicates that genome modification in HLA-A*02:01 transgenic humanized mice did not affect functioning of the immune system. No similar dynamics of the increase in antibody titers was observed in the mice line with mouse β2-microglobulin gene knockout. On the 7th and 30th day, the antibody titer in this group increased to a value of 1:400 and 1:6,400, respectively. The weak immune response in mice with mouse β2-microglobulin gene knockout confirms the undeniably important role of  this protein in immune response formation.

антителаантигениммунный ответиммуноферментный анализтрансгенные мышинокаутные мышиHLA-A*02:01β2-микроглобулинantibodiesantigenimmune responseenzyme-linked immunosorbent assaytransgenic miceknockout miceHLA-A*02:01β2-microglobulinReferencesКаркищенко В.Н., Болотских Л.А., Капанадзе Г.Д., Каркищенко Н.Н., Колоскова Е.М., Максименко С.В., Матвеенко Е.Л., Петрова Н.В., Рябых В.П., Ревякин А.О., Станкова Н.В., Семёнов Х.Х. Создание линий трансгенных животных-моделей с генами человека NAT1 и NAT2. Биомедицина. 2016;1:74–84.Karkischenko V.N., Bolotskih L.A., Kapanadze G.D., Karkischenko N.N., Koloskova E.M., Maksimenko S.V., Matveyenko E.L., Petrova N.V., Ryabyh V.P., Revyakin A.O., Stankova N.V., Semenov H.H. Sozdanie linij transgennyh zhivotnyh-modelej s genami cheloveka NAT1 i NAT2 [Creation of lines of transgenic animal models with human NAT1 and NAT2 genes]. Biomedicina [Journal Biomed]. 2016;1:74–84. (In Russian).Каркищенко В.Н., Рябых В.П., Болотских Л.А., Семенов Х.Х., Капанадзе Г.Д., Петрова Н.В., Езерский В.А., Жукова О.Б., Колоскова Е.М., Максименко С.В., Столярова В.Н., Трубицина Т.П. Физиолого-эмбриологические аспекты создания трансгенных мышей с интегрированными генами NAT1 и NAT2 человека. Биомедицина. 2016;1:52–65.Karkischenko V.N., Ryabyh V.P., Bolotskih L.A., Semenov H.H., Kapanadze G.D., Petrova N.V., Ezerskij V.A., Zhukova O.B., Koloskova E.M., Maksimenko S.V., Stolyarova V.N., Trubicina T.P. Fiziologo-embriologicheskie aspekty sozdaniya transgennyh myshej s integrirovannymi genami NAT1 i NAT2 cheloveka [Physiological and Embryological Aspects of Creation of Transgenic Mice with Integrated Human NAT1 and NAT2 Genes]. Biomedicina [Journal Biomed]. 2016;1:52–65. (In Russian).Каркищенко Н.Н., Лазарев В.Н., Манувера В.А., Бобровский П.А., Петрова Н.В., Колоскова Е.М., Глотова Е.С. Принципы создания генно-инженерной конструкции для получения гуманизированных трансгенных мышей, несущих ген HLA-С*07:02:01:01, как прообраз инновационных трансгенно-нокаутных биомоделей. Биомедицина. 2024;20(1):8–20.Karkischenko N.N., Lazarev V.N., Manuvera V.A., Bobrovsky P.A., Petrova N.V., Koloskova E.M., Glotova E.S. Principy sozdaniya genno-inzhenernoj konstrukcii dlya polucheniya gumanizirovannyh transgennyh myshej, nesushchih gen HLA-С*07:02:01:01, kak proobraz innovacionnyh transgenno-nokautnyh biomodelej [Principles of Creation of a Genetic Engineering Construction for Obtaining Humanized Transgenic Mice with HLA-C*07:02:01:01, as a Promote of Innovative Transgenic and Knockout Biomodels]. Biomedicina [Journal Biomed]. 2024;20(1):8–20. (In Russian).Савченко Е.С., Огнева Н.С., Каркищенко Н.Н. Эмбриологические аспекты создания новой гуманизированной трансгенной линии мышей с интегрированным геном человека HLA A*02:01:01:01. Биомедицина. 2022;18(4):10–23.Savchenko E.S., Ogneva N.S., Karkischenko N.N. Embriologicheskie aspekty sozdaniya novoj gumanizirovannoj transgennoj linii myshej s integrirovannym genom cheloveka HLA-A*02:01:01:01 [Embryological Aspects of Creation a New Humanized Transgenic Mice with Integrated human HLA-A*02:01:01:01 gene]. Biomedicina [ Journal Biomed]. 2022;18(4):10–23. (In Russian).Chuprin J., Buettner H., Seedhom M.O., et al. Humanized mouse models for immuno-oncology research. Nat. Rev. Clin. Oncol. 2023;20(3):192–206. DOI: 10.1038/s41571-022-00721-2.Chuprin J., Buettner H., Seedhom M.O., et al. Humanized mouse models for immuno-oncology research. Nat. Rev. Clin. Oncol. 2023;20(3):192–206. DOI: 10.1038/s41571-022-00721-2.Flisikowska T., Egli J., Flisikowski K., et al. A humanized minipig model for the toxicological testing of therapeutic recombinant antibodies. Nat. Biomed. Eng. 2022;6(11):1248–1256. DOI: 10.1038/s41551-022-00921-2.Flisikowska T., Egli J., Flisikowski K., et al. A humanized minipig model for the toxicological testing of therapeutic recombinant antibodies. Nat. Biomed. Eng. 2022;6(11):1248–1256. DOI: 10.1038/s41551-022-00921-2.Scardino A., Correale P., Firat H., et al. In vivo study of the GC90/IRIV vaccine for immune response and autoimmunity into a novel humanised transgenic mouse. Br. J. Cancer. 2003;89(1):199–205. DOI: 10.1038/sj.bjc.6601028.Scardino A., Correale P., Firat H., et al. In vivo study of the GC90/IRIV vaccine for immune response and autoimmunity into a novel humanised transgenic mouse. Br. J. Cancer. 2003;89(1):199–205. DOI: 10.1038/sj.bjc.6601028.Wright P.F. International standards for test methods and reference sera for diagnostic tests for antibody detection. Rev. Sci. Tech. 1998;17(2):527–549. DOI: 10.20506/rst.17.2.1118.Wright P.F. International standards for test methods and reference sera for diagnostic tests for antibody detection. Rev. Sci. Tech. 1998;17(2):527–549. DOI: 10.20506/rst.17.2.1118.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.