scbmtБИОМЕДИЦИНАJournal Biomed2074-59822713-0428Scientific center of biomedical technologies of Federal Medical and Biological Agency10.33647/2074-5982-20-4-18-26scbmt-1669Research ArticleБИОТЕХНОЛОГИИ В БИОМЕДИЦИНЕBIOTECHNOLOGIES IN BIOMEDICINEБиотехнология получения диагностикума латексного бруцеллёзного антигенного на основе полиакролеиновых микросферProduction Biotechnology for a Brucellosis Antigenic Latex Diagnosticum Based on Polyacrolein MicrospheresКурноскинаМ. М.KurnoskinaM. M.

Курноскина Мария Михайловна

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

Mariya M. Kurnoskina

355035, Stavropol, Sovetskaya Str., 13–15 

kurnoskina_mariya@mail.ruЖарниковаИ. В.ZharnikovaI. V.

Жарникова Ирина Викторовна, д.б.н.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

Irina V. Zharnikova, Dr. Sci. (Biol.)

355035, Stavropol, Sovetskaya Str., 13–15 

jarnikova_iv@snipchi.ruРусановаД. В.RusanovaD. V.

Русанова Диана Владимировна, к.м.н.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

Diana V. Rusanova, Cand. Sci. (Med.)

355035, Stavropol, Sovetskaya Str., 13–15 

rusanova_dv@snipchi.ruКошкидькоА. Г.KoshkidkoA. G.

Кошкидько Александра Геннадьевна, к.б.н.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

Aleksandra G. Koshkidko, Cand. Sci. (Biol.)

355035, Stavropol, Sovetskaya Str., 13–15 

koshkidko_ag@snipchi.ruЖдановаЕ. В.ZhdanovaE. V.

Жданова Елена Владимировна, к.б.н.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

Elena V. Zhdanova, Cand. Sci. (Biol.)

355035, Stavropol, Sovetskaya Str., 13–15 

jdanova_ev@snipchi.ruПономаренкоД. Г.PonomarenkoD. G.

Пономаренко Дмитрий Григорьевич, к.б.н.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

Dmitriy G. Ponomarenko, Cand. Sci. (Biol.)

355035, Stavropol, Sovetskaya Str., 13–15 

ponomarenko_dg@snipchi.ruФКУЗ Ставропольский противочумный институт РоспотребнадзораРоссияStavropol Research Anti-Plague Institute of the Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Wellbeing of RussiaRussian Federation2024101220242041826Copyright © Курноскина М.М., Жарникова И.В., Русанова Д.В., Кошкидько А.Г., Жданова Е.В., Пономаренко Д.Г., 20242024Курноскина М.М., Жарникова И.В., Русанова Д.В., Кошкидько А.Г., Жданова Е.В., Пономаренко Д.Г.Kurnoskina M.M., Zharnikova I.V., Rusanova D.V., Koshkidko A.G., Zhdanova E.V., Ponomarenko D.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.scbmt.ru/jour/article/view/1669

Цель исследования состояла в разработке биотехнологии производства диагностикума латексного бруцеллёзного антигенного на основе полиакролеиновых микросфер, предназначенного для выявления антител против бруцеллёза в реакции агглютинации латекса при исследовании сывороток крови людей. Отработаны оптимальные условия сенсибилизации латекса антигеном в соотношении 1:3 при температуре 45°С в течение 3 ч с последующей блокировкой активных центров 0,5% желатином. Исследования показали высокую эффективность препарата в перспективе его использования для диагностики бруцеллёза. Аналитическая чувствительность диагностикума составила не менее 1:2560, при отсутствии перекрёстных реакций с гетерологичными сыворотками. Контроль диагностических характеристик экспериментальных серий препарата показал их чувствительность — 80%, специфичность — 93,33%.

This research was aimed at developing a biotechnology for obtaining a latex brucellosis antigenic diagnosticum based on polyacrolein microspheres. This diagnosticum is intended for detecting antibodies against brucellosis in a latex agglutination reaction in human blood sera. Optimal conditions for latex sensitization with the antigen in the ratio of 1:3 at 45°C for 3 h followed by blocking of active centers with 0.5% gelatin were determined. The developed preparation showed high efficiency, which confirmed its prospects for brucellosis diagnostics. The analytical sensitivity of the diagnosticum was not less than 1:2560, in the absence of cross-reactions with heterologous sera. The diagnostic characteristics of experimental series of the preparation in control testing showed a sensitivity of 80% and a specificity of 93.33%.

бруцеллёзреакция агглютинации латексаполиакролеиновые микросферыантигеныbrucellosislatex agglutination reactionpolyacrolein microspheresantigensReferencesЗайцев А.А. Способ получения диагностикума суспензионного чумного антигенного на основе фракции I. Патент РФ № 2199750, 2003.Zajtsev А.А. Sposob polucheniya diagnostikuma suspenzionnogo chumnogo antigennogo na osnove fraktsii I [Method for producing pest antigen suspension diagnosticum on the basis of fraction I]. Patent RF No. 2199750, 2003. (In Russian).Кедик С.А., Грицкова И.А., Прокопов Н.И., Станишевский Я.М., Панов А.В., Суслов В.В., Петрова Е.А. Высокочувствительные тест-системы на основе конъюгатов «полимерная микросфера — биолиганд» для экспресс-диагностики протеинопатий. Вестник МИТХТ им. М.В. Ломоносова. 2013;8(4):3–10.Kedik S.A., Gritskova I.A., Prokopov N.I., Stanishevsky Ya.M., Panov A.V., Suslov V.V., Petrova E.A. Vysokochuvstvitel'nye test-sistemy na osnove kon"yugatov «polimernaya mikrosfera — bioligand» dlya ekspress-diagnostiki proteinopatiy [High-sensitivity test systems based on conjugates “polymer microspheres — bioligands” for rapid proteinopathy diagnostics]. Vestnik MITKhT im. M.V. Lomonosova [Journal of the Moscow State University of Fine Chemical Technologies named after M.V. Lomonosov]. 2013;8(4):3–10. (In Russian).Кожушный А.П., Кохановская Н.А., Третьяков О.Ю., Баженов А.И., Коноплева М.В., Суслов А.П. Продукция цитокинов в ранних антигенстимулированных клеточных реакциях при вирусной инфекции. Медицинская иммунология. 2011;13(4–5):389–391.DOI: 10.15789/1563-0625-2011-4-5-378-415Kozhushny A.P., Kokhanovskaya N.A., Tretyakov O.Yu., BazhenovA.I., Konopleva M.V., Suslov A.P. Produktsiya tsitokinov v rannikh antigenstimulirovannykh kletochnykh reaktsiyakh pri virusnoy infektsii [Cytokine production in early antigen-stimulated cellular responses during viral infection]. Meditsinskaya immunologiya [Medical Immunology (Russia)]. 2011;13(4–5):389– 391. (In Russian). DOI: 10.15789/1563-0625-2011-4-378-415Куделина А.М., Новицкая И.В., Прохватилова Е.В. Конструирование диагностикума для выявления возбудителей мелиоидоза в реакции латекс-агглютинации. Дальневосточный журнал инфекционной патологии. 2014;25:139–141.Kudelina A.M., Novitskaya I.V., Prokhvatilova E.V. Konstruirovanie diagnostikuma dlya vyyavleniya vozbuditeley melioidoza v reaktsii lateks-agglyutinatsii [Development of diagnosticum for the detection of melioidosis agents in latex agglutination reaction]. Dal'nevostochnyy zhurnal infektsionnoy patologii [Far Eastern Journal of Infectious Pathology]. 2014;25:139–141. (In Russian).Онищенко Г.Г., Куличенко А.Н., Малецкая О.В., Пономаренко Д.Г., Манин Е.А., Ковалёв Д.А., Русанова Д.В., Саркисян Н.С., Таран Т.В., Ракитина Е.Л., Осина Н.А., Касьян Ж.А., Касьян И.А., Щербакова С.А., Кулаков Ю.К., Михайлова В.В., Ляпина Е.П., Шульдяков А.А., Лёвин Д.Ю. Бруцеллёз. Современное состояние проблемы. Ставрополь: ООО «Губерния», 2019.Onishchenko G.G., Kulichenko A.N., Maletskaya O.V., Ponomarenko D.G., Manin E.A., Kovalev D.A., Rusanova D.V., Sarkisyan N.S., Taran T.V., Rakitina E.L., Osina N.A., Kasyan Zh.A., Kasyan I.A., Shcherbakova S.A., Kulakov Yu.K., Mikhailova V.V., Lyapina E.P., Shuldyakov A.A., Levin D.Yu. Brutsellez. Sovremennoe sostoyanie problemy [Brucellosis. Current state of the problem]. Stavropol: OOO “Guberniya” Publ., 2019. (In Russian).Пономаренко Д.Г., Хачатурова А.А., Ковалёв Д.А., Скударева О.Н., Лукашевич Д.Е., Жаринова И.В., Даурова А.В., Германова А.Н., Логвиненко О.В., Ракитина Е.Л., Костюченко М.В., Кузнецова И.В., Шапаков Н.А., Бобрышева О.В., Писаренко С.В., Манин Е.А., Малецкая О.В., Куличенко А.Н. Анализ заболеваемости бруцеллёзом и молекулярно-генетическая характеристика популяции бруцелл на территории Российской Федерации. Проблемы особо опасных инфекций. 2023;2:61– 74. DOI: 10.21055/0370-1069-2023-2-61-74Ponomarenko D.G., Khachaturova A.A., Kovalev D.A., Skudareva O.N., Lukashevich D.E., Zharinova I.V., Daurova A.V., Germanova A.N., Logvinenko O.V., Rakitina E.L., Kostyuchenko M.V., Kuznetsova I.V., Shapakov N.A., Bobrysheva O.V., Pisarenko S.V., Manin E.A., Maletskaya O.V., Kulichenko A.N. Analiz zabolevaemosti brutsellezom i molekulyarno-geneticheskaya kharakteristika populyatsii brutsell na territorii Rossiyskoy Federatsii [Analysis of brucellosis incidence and molecular-genetic characteristics of brucella population in the territory of the Russian Federation]. Problemy osobo opasnykh infektsiy [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2023;2:61–74. (In Russian). DOI: 10.21055/0370-1069-2023-2-61-74Симакова Д.И., Карбышев Г.Л., Ларионова Л.В., Терентьев А.Н., Лысова Л.К., Наркевич А.Н., Кочеткова А.П., Санамянц Е.М. Псевдотуберкулезный видоспецифический антигенный полимерный диагностикум. Принципы конструирования и результаты испытания. Биотехнология. 2011;3:88–95.Simakova D.I., Karbyshev G.L., Larionova L.V., Terentiev A.N., Lysova L.K., Narkevich A.N., Kochetkova A.P., Sanamyants E.M. Psevdotuberkuleznyy vidospetsificheskiy antigennyy polimernyy diagnostikum. Printsipy konstruirovaniya i rezul'taty ispytaniya [A pseudotuberculosis species-specific antigenic polymeric diagnosticum. Principles of designing and results of testing]. Biotekhnologiya [Biotechnology in Russia]. 2011;3:80–88. (In Russian).Фролов Д.М., Сенина Т.В., Замарина Т.В., Храпова Н.П. Использование реакции латекс-агглютинации в ускоренном определении патогенных Буркхольдерий. Проблемы особо опасных инфекций. 2019;3:106–110. DOI: 10.21055/0370-1069-2019-3- 106-110Frolov D.M., Senina T.V., Zamarina T.V., Khrapova N.P. Ispol'zovanie reaktsii lateks-agglyutinatsii v uskorennom opredelenii patogennykh Burkkhol'deriy [Application of latex-agglutination for rapid detection of pathogenic Burkholderia]. Problemy osobo opasnykh infektsiy [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2019;3:106– 110. (In Russian). DOI: 10.21055/0370-1069-2019-3-106-110El-Sayed A., Awad W. Brucellosis: Evolution and expected comeback. Int. J. Vet. Sci. Med. 2018;6(Suppl):S31– S35. DOI: 10.1016/j.ijvsm.2018.01.008El-Sayed A., Awad W. Brucellosis: Evolution and expected comeback. Int. J. Vet. Sci. Med. 2018;6(Suppl):S31– S35. DOI: 10.1016/j.ijvsm.2018.01.008Greenhalgh T. How to read a paper: The basics of evidence-based medicine and health are. Hoboken: John Wiley & Sons Ltd, 2019.Greenhalgh T. How to read a paper: The basics of evidence-based medicine and health are. Hoboken: John Wiley & Sons Ltd, 2019.Pereira C.R., Cotrim de Almeida J.V.F., Cardoso de Oliveira I.R., Faria de Oliveira L., Pereira L.J., Zangerônimo M.G., Lage A.P., Dorneles E.M.S. Occupational exposure to Brucella spp.: A systematic review and meta-analysis. PLOS Neglected Tropical Diseases. 2020;14(5):e0008164. DOI: 10.1371/journal.pntd.0008164Pereira C.R., Cotrim de Almeida J.V.F., Cardoso de Oliveira I.R., Faria de Oliveira L., Pereira L.J., Zangerônimo M.G., Lage A.P., Dorneles E.M.S. Occupational exposure to Brucella spp.: A systematic review and meta-analysis. PLOS Neglected Tropical Diseases. 2020;14(5):e0008164. DOI: 10.1371/journal.pntd.0008164

The authors declare that there are no conflicts of interest present.