scbmtБИОМЕДИЦИНАJournal Biomed2074-59822713-0428Scientific center of biomedical technologies of Federal Medical and Biological Agencyscbmt-521Research ArticleДОКЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯNON-CLINICAL RESEARCHESВлияние трегалозы на сохранность мембран, подвижность и фрагментацию хроматина эпидидимальных сперматозоидов мышей при гипотермическом хранении в безэлектролитных средахEffect of trehalose on the safety membrane, motility and epididymal sperm chromatin fragmentation mice during hypothermic storage in electrolyte-free bufferИсаевД. А.IsaevD. A.isaev@hotmail.ruМартыноваМ. Ю.MartynovaM. Yu.noemail@neicon.ruВолодяевИ. В.VolodyaevI. V.noemail@neicon.ruРевякинА. О.RevyakinA. O.noemail@neicon.ruФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт ирригационного рыбоводства»Russian FederationМосковский государственный университет им. М.В. ЛомоносоваRussian FederationФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий ФМБА России»Russian Federation201522012020146976Copyright © Исаев Д.А., Мартынова М.Ю., Володяев И.В., Ревякин А.О., 20202020Исаев Д.А., Мартынова М.Ю., Володяев И.В., Ревякин А.О.Isaev D.A., Martynova M.Y., Volodyaev I.V., Revyakin A.O.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.scbmt.ru/jour/article/view/521

В работе представлены данные о гипотермическом хранении без замораживания эпидидимальных сперматозоидов мышей линии C57BL/6 в двух безэлектролитных консервантах на основе глюкозы и альбумина, один из которых содержал 50 мМ трегалозы. Трегалоза в составе консерванта значительно снижала относительное количество сперматозоидов с поврежденными мембранами после 14 суток хранения по сравнению с консервантом без трегалозы (1,4±0,4% и 8,2±1,2% соответственно; p=0,00; N=16). В то же время, для обоих консервантов не установлены различия по способности сперматозоидов восстанавливать подвижность после хранения (p=0,57; N=16), а также по фрагментации хроматина (p=0,69; N=12). Эти наблюдения могут быть полезными при оптимизации методики гипотермического хранения спермы человека в репродуктивной медицине.

This work presents data on hypothermic storage without freezing of epididymal sperm of C57BL/6 mice in two electrolyte-free preservative buffers based on glucose and albumin, one of them supplied with 50 mM trehalose. The adding of trehalose in preservative buffer brought down significantly percentage of spermatozoa with damaged membrane after 14 days of storage as compared to solution without trehalose (1.4±0.4% vs 8.2±1.2%; p=0.00; N=16). At the same time, there were no differences between two buffers in the ability of sperm to regain motility after storage (p=0.57; N=16) as well in the chromatin fragmentation (p=0.69; N=12). Our findings might be useful for optimization of hypothermic storage protocol for human sperm in reproductive medicine.

гипотермическое хранение спермыбезэлектролитная средатрегалозаhypothermic sperm storageelectrolyte-free buffertrehaloseReferencesИсаев Д.А., Заева В.В., Бакурадзе Р.В. и др. Хранение спермы человека в течение 2 недель без замораживания // Проблемы репродукции. 2009. V. 5. P. 33-35.Исаев Д.А., Заева В.В., Бакурадзе Р.В. и др. Хранение спермы человека в течение 2 недель без замораживания // Проблемы репродукции. 2009. V. 5. P. 33-35.Исаев Д.А., Мартынова М.Ю., Шишанова Е.И. и др. Гипотермическое хранение спермы осетровых рыб в изотонических растворах // Рыбоводство и рыбное хозяйство. 2013. № 10. С. 41-49.Исаев Д.А., Мартынова М.Ю., Шишанова Е.И. и др. Гипотермическое хранение спермы осетровых рыб в изотонических растворах // Рыбоводство и рыбное хозяйство. 2013. № 10. С. 41-49.Исаев Д.А. Гипотермическое хранение спермы стерляди в консервантах на основе трегалозы: предварительное исследование // В сб.: «Перспективы и проблемы развития аквакультуры в составе АПК»: Материалы Всероссийской научно-практической конференции (Москва, ВВЦ, 4-6 февраля 2014 г.) / ГНУ ВНИИР. - М.: Изд. «Перо», 2014. С. 131-137.Исаев Д.А. Гипотермическое хранение спермы стерляди в консервантах на основе трегалозы: предварительное исследование // В сб.: «Перспективы и проблемы развития аквакультуры в составе АПК»: Материалы Всероссийской научно-практической конференции (Москва, ВВЦ, 4-6 февраля 2014 г.) / ГНУ ВНИИР. - М.: Изд. «Перо», 2014. С. 131-137.Исаев Д.А., Захарова Е.Е., Капралова И.В. и др. Краткосрочное хранение спермы без замораживания в программах ЭКО/ИКСИ // Проблемы репродукции. 2015. № 4. С.65-70.Исаев Д.А., Захарова Е.Е., Капралова И.В. и др. Краткосрочное хранение спермы без замораживания в программах ЭКО/ИКСИ // Проблемы репродукции. 2015. № 4. С.65-70.Ahmad E., Aksoy M. Trehalose as a cryoprotective agent for the sperm cells: a mini review // Animal health, prod. and hyg. 2012. V. 1. P. 123-129.Ahmad E., Aksoy M. Trehalose as a cryoprotective agent for the sperm cells: a mini review // Animal health, prod. and hyg. 2012. V. 1. P. 123-129.Brito L.F., Barth A.D., Bilodeau-Goeseels S., et al. Comparison of methods to evaluate the plasmalemma of bovine sperm and their relationship with in vitro fertilization rate // Theriogenology. 2003. V. 60. P. 1539-1551.Brito L.F., Barth A.D., Bilodeau-Goeseels S., et al. Comparison of methods to evaluate the plasmalemma of bovine sperm and their relationship with in vitro fertilization rate // Theriogenology. 2003. V. 60. P. 1539-1551.Fernández J.L., Muriel L., Rivero M.T., et al. The sperm chromatin dispersion test: a simple method for the determination of sperm DNA fragmentation // J. Androl. 2003. V. 24. P. 59-66.Fernández J.L., Muriel L., Rivero M.T., et al. The sperm chromatin dispersion test: a simple method for the determination of sperm DNA fragmentation // J. Androl. 2003. V. 24. P. 59-66.Kanno H., Saito K., Ogawa T., et al. Viability and function of human sperm in electrolyte-free cold preservation // Fertil. steril. 1998. V. 69. P. 127-131.Kanno H., Saito K., Ogawa T., et al. Viability and function of human sperm in electrolyte-free cold preservation // Fertil. steril. 1998. V. 69. P. 127-131.Keskintepe L., Eroglu A. Freeze-drying of mammalian sperm // Methods mol. biol. 2015. V. 1257. P. 489-497.Keskintepe L., Eroglu A. Freeze-drying of mammalian sperm // Methods mol. biol. 2015. V. 1257. P. 489-497.McGinnis L.K., Zhu L., Lawitts J.A., et al. Mouse sperm desiccated and stored in trehalose medium without freezing // Biol. reprod. 2005. V. 73. P. 627-633.McGinnis L.K., Zhu L., Lawitts J.A., et al. Mouse sperm desiccated and stored in trehalose medium without freezing // Biol. reprod. 2005. V. 73. P. 627-633.Pérez-Cerezales S., Miranda A., Gutiérrez-Adán A. Comparison of four methods to evaluate sperm DNA integrity between mouse caput and cauda epididymidis // Asian J. Androl. 2012. V. 14. P. 335-337.Pérez-Cerezales S., Miranda A., Gutiérrez-Adán A. Comparison of four methods to evaluate sperm DNA integrity between mouse caput and cauda epididymidis // Asian J. Androl. 2012. V. 14. P. 335-337.Quan S., Yamano S., Nakasaka H., et al. Effects of preservation of mouse spermatozoa in electrolyte-free solution at 4 degrees C on the outcome of mouse in vitro fertilization // J. Assist. reprod. genet. 2000. V. 17. P. 388-392.Quan S., Yamano S., Nakasaka H., et al. Effects of preservation of mouse spermatozoa in electrolyte-free solution at 4 degrees C on the outcome of mouse in vitro fertilization // J. Assist. reprod. genet. 2000. V. 17. P. 388-392.Quan S., Zhou H.K., Shuji Y., et al. Fertilizing capacity of human sperm preserved in cold electrolyte-free solution // Di Yi Jun Yi Da Xue Xue Bao. 2002. V. 22. P. 928-930.Quan S., Zhou H.K., Shuji Y., et al. Fertilizing capacity of human sperm preserved in cold electrolyte-free solution // Di Yi Jun Yi Da Xue Xue Bao. 2002. V. 22. P. 928-930.Riel J.M., Huang T.T., Ward M.A. Freezing-free preservation of human spermatozoa - a pilot study // Arch. Androl. 2007. V. 53. P. 275-284.Riel J.M., Huang T.T., Ward M.A. Freezing-free preservation of human spermatozoa - a pilot study // Arch. Androl. 2007. V. 53. P. 275-284.Riel J.M., Yamauchi Y., Huang T.T., et al. Short-term storage of human spermatozoa in electrolyte-free medium without freezing maintains sperm chromatin integrity better than cryopreservation // Biol. reprod. 2011. V. 85. P. 536-547.Riel J.M., Yamauchi Y., Huang T.T., et al. Short-term storage of human spermatozoa in electrolyte-free medium without freezing maintains sperm chromatin integrity better than cryopreservation // Biol. reprod. 2011. V. 85. P. 536-547.Saito K., Kinoshita Y., Kanno H., et al. A new method of the electrolyte-free long-term preservation of human sperm at 4 °C // Fertil. steril. 1996. V. 65. P. 1210-1213.Saito K., Kinoshita Y., Kanno H., et al. A new method of the electrolyte-free long-term preservation of human sperm at 4 °C // Fertil. steril. 1996. V. 65. P. 1210-1213.Saito K., Kinoshita Y., Yumura Y., et al. Effects of extracellular ions on the reactivation of human spermatozoa preserved in electrolyte-free solution // Andrologia. 1999. V. 31. P. 211-215.Saito K., Kinoshita Y., Yumura Y., et al. Effects of extracellular ions on the reactivation of human spermatozoa preserved in electrolyte-free solution // Andrologia. 1999. V. 31. P. 211-215.Songsasen N., Leibo S.P. Cryopreservation of mouse spermatozoa. I. Effect of seeding on fertilizing ability of cryopreserved spermatozoa // Cryobiology. 1997. V. 35. P. 240-254.Songsasen N., Leibo S.P. Cryopreservation of mouse spermatozoa. I. Effect of seeding on fertilizing ability of cryopreserved spermatozoa // Cryobiology. 1997. V. 35. P. 240-254.Wysokińska A., Kondracki S. Assessment of changes in sperm cell membrane integrity occurring during the storage of semen from genetically different males using two diagnostic methods // Canadian J. of animal science. 2014. V. 94. P. 601-606.Wysokińska A., Kondracki S. Assessment of changes in sperm cell membrane integrity occurring during the storage of semen from genetically different males using two diagnostic methods // Canadian J. of animal science. 2014. V. 94. P. 601-606.Yildiz C., Ottaviani P., Law N., et al. Effects of cryopreservation on sperm quality, nuclear DNA integrity, in vitro fertilization, and in vitro embryo development in the mouse // Reproduction. 2007. V. 133. P. 585-595.Yildiz C., Ottaviani P., Law N., et al. Effects of cryopreservation on sperm quality, nuclear DNA integrity, in vitro fertilization, and in vitro embryo development in the mouse // Reproduction. 2007. V. 133. P. 585-595.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.