Preview

БИОМЕДИЦИНА

Расширенный поиск

Культивирование эмбрионов мышей на различных питательных средах до стадии двух бластомеров после микроинъекции генно-инженерной конструкцией

https://doi.org/10.33647/2713-0428-17-3E-53-58

Полный текст:

Аннотация

Преимплантационные эмбрионы мышей на сегодняшний день остаются самой популярной моделью, которая обычно используется для исследования раннего развития млекопитающих. Культивирование доимплантационных зародышей млекопитающих вне организма является необходимым звеном при проведении экспериментально-эмбриологических исследований, а также эмбриотехнологических работ по клонированию и получению трансгенных животных. Нормальный рост и дифференцировка эмбрионов млекопитающих in vitro во время доимплантационного периода зависят от наличия соответствующих метаболических субстратов. Вот почему так важно подобрать оптимальные условия культивирования при работе с микроинъецированными эмбрионами, поскольку любые манипуляции снижают их жизнеспособность, что особенно важно при получении трансгенных животных.

Для определения наиболее эффективной культуральной среды нами было проведено исследование выживаемости эмбрионов мыши после микроинъекции генно-инженерной конструкции в пронуклеусы и дальнейшего культивирования на питательных средах М16 и Onestep. Было отмечено увеличение количества эмбрионов, развившихся до стадии двух бластомеров на среде Onestep, по сравнению со средой М16. Также были выявлены различия в двух контрольных группах, эмбрионы в которых не подвергались микроинъекции, но культивировались на этих же средах в тех же условиях, что и эмбрионы опытных групп. Более эффективной средой для культивирования интактных эмбрионов оказалась среда Onestep, в которой процент выживших эмбрионов был больше, чем в среде М16. 

Об авторах

С. В. Максименко
ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий ФМБА России»
Россия

к.б.н.,

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1



Е. С. Савченко
ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий ФМБА России»
Россия

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1



Н. С. Огнева
ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий ФМБА России»
Россия

143442, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, 1



Список литературы

1. Вильянович Л.И., Кривохарченко А.С. Культивирование двуклеточных эмбрионов мышей in vitro в среде DMEM без белка. Проблемы репродукции. 1999;4:22–25.

2. Раннева С.В., Брусенцевa Е.Ю., Игонина Т.Н., Рагаева Д.С., Рожкова И.Н., Ершовa Н.И., Левинсон А.Л., Амстиславский С.Я. Влияние культивирования эмбрионов на онтогенез потомства у млекопитающих. Онтогенез. 2020;51(6):417–439. DOI: 10.31857/S0475145020060075.

3. Baltz J.M. Connections between preimplantation embryo physiology and culture. J. Assist Reprod. Genet. 2013;30(8):1001–1007. DOI: 10.1007/s10815-013-0095-x.

4. Dai S.-J., Xu Ch.-L., Wang J., Sun Y.-P. Effect of culture medium volume and embryo density on early mouse embryonic development: Tracking the development of the individual embryo. J. Assist. Reprod. Genet. 2012;29(7):617–623. DOI: 10.1007/s10815- 012-9744-8.

5. Fleming T.P., Wing Y.K., Porter R., Ursell E., Fesenko I., Wilkins A., Miller D.J., Watkins A.J., Eckert J.J. The embryo and its future. Biology of Reproduction. 2004;71(4):1046–1054. DOI: 10.1095/biolreprod.104.030957.

6. Hogan B., Costantini F., Lacy E. Manipulating the mouse embryo: A laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor, 1986:332.

7. Khurana N.K., Niemann H. Effects of oocyte quality, oxygen tension, embryo density, cumulus cells and energy substrates on cleavage and morula/blastocyst formation of bovine embryos. Theriogenology. 2020;54(5):741–756. DOI: 10.1016/S0093-691X(00)00387-3.

8. Popova E., Bader M., Krivokharchenko A. Effect of culture conditions on viability of mouse and rat embryos developed in vitro. Genes (Basel). 2011;2(2):332–344. DOI: 10.3390/genes2020332.

9. Summers M.C., Biggers J.D. Chemically defined media and the culture of mammalian preimplantation embryos: Historical perspective and current issues. Hum. Reprod. Update. 2003;9(6):557–582. DOI: 10.1093/humupd/dmg039.


Для цитирования:


Максименко С.В., Савченко Е.С., Огнева Н.С. Культивирование эмбрионов мышей на различных питательных средах до стадии двух бластомеров после микроинъекции генно-инженерной конструкцией. БИОМЕДИЦИНА. 2021;17(3E):53-58. https://doi.org/10.33647/2713-0428-17-3E-53-58

For citation:


Maksimenko S.V., Savchenko E.S., Ogneva N.S. Cultivation of mice embryos on various nutrient media up to the stage of two blastomers after the microinjection of a genetically-engineered construct. Journal Biomed. 2021;17(3E):53-58. (In Russ.) https://doi.org/10.33647/2713-0428-17-3E-53-58

Просмотров: 29


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2074-5982 (Print)
ISSN 2713-0428 (Online)