Технологические аспекты получения субстанции стабилизированных в липидах устойчивых наночастиц, содержащих комплекс биологически активных веществ, выделенных из мускуса кабарги

С целью сохранения и повышения биологической эффективности комплекса биологически активных веществ (БАВ), выделенных из мускуса кабарги, изучены технологические аспекты получения субстанции стабилизированных в липидах устойчивых наночастиц, содержащих комплекс БАВ, и выполнена оценка ее стабильности. Установлено, что оптимальным способом получения является гомогенизация под высоким давлением. Разработаны режимы приготовления липосомальной формы БАВ с заранее заданными параметрами дисперсности — средним диаметром частиц 250±100 нм, индексом полидисперсности 0,3±0,1 и дзета-потенциалом от –5 до –35 мВ. Установлено, что гомогенизатор высокого давления «Донор-5» позволяет получать липосомальные дисперсии со стандартными параметрами и степенью включения БАВ мускуса до 60%, а также обеспечивает минимальное окисление и гидролиз фосфолипидов (индекс окисленности 0,3). Исследования показали, что использование отечественного фосфатидилхолина является экономически оправданным и позволяет получать липосомальные формы надлежащего качества. Показатели качества полученной липосомальной субстанции охарактеризованы соответствующими методами анализа (динамическое светорассеяние, электронная микроскопия, гель-размерная хроматография, хромато-масс-спектрометрия и др.). На основании полученных результатов разработан проект спецификации на липосомальную субстанцию (порошок), содержащую комплекс БАВ, выделенных из мускуса кабарги. Разработанную технологию получения липосомальной формы БАВ из мускуса кабарги можно масштабировать в соответствии с требованиями GMP.

1. Баллюзек Ф.К., Куркаев А.С., Сенте Л. Нанотехнологии для медицины. СПб.: Сезам-Принт, 2008:104.

2. Борщевский Г.И. Определение индекса окисленности липосомальных наночастиц. Химия и химические технологии. 2015;9:25–26.

3. Борщевський Г.І., Комаров І.В., Кулініч А.В. Фактори, які впливають на стабільність препарату Лесфаль. Управління, економіка та забезпечення якості в фармації. 2013;6:10–14.

4. Быковский С.Н., Василенко И.А., Демина Н.Б., Шохин И.Е., Новожилов О.В., Мешковский А.П., Спицкий О.Р. Фармацевтическая разработка: концепция и практические рекомендации. Научнопракт. рук-во для фармацевтической отрасли. М.: Перо, 2015:472.

5. Грегориадис Г., Аллисон А. Липосомы в биологических системах. М.: Медицина, 1983:384.

6. Зефиров Н.С., Кнунянц И.Л., Кулов Н.Н. Химическая энциклопедия. М.: Советская энциклопедия. 1990:80–82.

7. Капцов В.В., Алымов А.В., Шибаев Н.В., Кукушкин В.И., Маевский Е.И. Выбор способов и устройств диспергирования для приготовления газопереносящих эмульсий ПФС. ВИНИТИ. 1984;148.

8. Каркищенко В.Н., Дуля М.С., Агельдинов Р.А., Люблинский С.Л., Каркищенко Н.Н. Липосомированная форма экстракта препуциальной железы кабарги — новое средство адаптогенного действия. Биомедицина. 2019;15(4):34–45.

9. Каркищенко В.Н., Дуля М.С., Хвостов Д.В., Агельдинов Р.А. Люблинский С.Л. Анализ биологически активных соединений мускуса кабарги Moschus moschiferus методом газовой хроматографии с масс-селективным детектором. Биомедицина. 2018;1:34–45.

10. Каркищенко В.Н., Дуля М.С., Хвостов Д.В., Агельдинов Р.А., Люблинский С.Л., Каркищенко Н.Н. Протеомный анализ в идентификации белковых компонентов препуциальной железы кабарги сибирской. Биомедицина. 2019;15(1):34–45.

11. Каркищенко В.Н., Каркищенко Н.Н., Шустов Е.Б. Фармакологические основы терапии. Тезаурус. Изд. 3-е — новая ред. М., СПб: Айсинг, 2018:288.

12. Краснопольский Ю.М., Дудниченко А.С., Швец В.И. Фармацевтическая биотехнология: бионанотехнология в фармации и медицине. Харьков: Издательский центр НТУ «ХПИ», 2011:227.

13. Краснопольский Ю.М., Степанов А.Е., Швец В.И. Технологические аспекты получения липосомальных препаратов в условиях GMP. Биофармацевтический журнал. 2009;1(3):18–29.

14. Кузякова Л.М., Ефременко В.И. Медикаментозное преодоление анатомических и клеточных барьеров с помощью липосом. Ставрополь: Б.и., 2000:169.

15. Посте Дж. Взаимодействие липидных везикул (липосом) с клетками в культуре и их использование как переносчиков лекарств и макромолекул. В кн.: Липосомы в биологических системах. М.: Медицина, 1988:107–155.

16. Рингсдорф Г., Шмидт Б. Системы полимерных носителей лекарств. Журнал всесоюзного химического общества им. Д.И. Менделеева. 1987;32(5):487– 501.

17. Сейфулла Р.Д. Фармакология липосомальных препаратов. М.: Глобус Контитенталь, 2010:241.

18. Уйба В.В., Котенко К.В., Коржачкина Н.Б., Петрова Н.Б., Михайлова А.А. Применение мускуса кабарги в клинической практике. Метод. реком. М., 2013:18.

19. Чазов Е.И., Смирнов В.Н., Торчилин В.П. Липосомы как средство направленного транспорта лекарств. Журнал всесоюзного химического общества им. Д.И. Менделеева, 1987;32(5):502–513.

20. Швец В.И., Краснопольский Ю.М., Сорокоумова Г.М. Липосомальные формы лекарственных препаратов: технологические особенности получения и применения в клинике. М.: Ремедиум, 2017:197.

21. Kaptsov V.V. Production PPG submicron emulsions and liposomes with high pressure homogenizer. “Donor-1”. Artificial cells, blood substitutes, and biotechnology, 1994;22(5):110.

22. Kaszuba M., McKnight D., Connah M.T., McNeil-Watson F.K., Nobbmann U. Measuring sub nanometer sizes using dynamic light scattering. J. of Nanoparticle Research, 2008;10:823–829.

23. Mahmud M., Piwoni A., Filipczak N., Janicka M., Gubernator J. Long-Circulating Curcumin-Loaded Liposome Formulations with High Incorporation Efficiency, Stability and Anticancer Activity towards Pancreatic Adenocarcinoma Cell Lines in vitro. PLoS One. 2016;11(12):e0167787.

24. Rejman J., Oberle V., Zuhom I.S., Hoekstra D. Size-dependent internalization of particles via the pathways of clatrin and caveolae-mediated endocytosis. Biochem. Journal, 2004;377(1):159–169.

25. Tohver V., Smay J.E., Braem A., Braun P.V., Lewis J.A. Nanoparticle halos: A new colloid stabilization mechanism. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2001;98(16):8950–8954.

26. https://bio.pnpi.nrcki.ru/wp-content/uploads/2020/01/Photocor-Compact-Z_Manual.pdf

27. https://www.malvernpanalytical.com/ru/products/measurement-type/zeta-potential