Модификация методики определения антиальфа-стафилолизина в плазме человека для фракционирования, осадке II+III и иммуноглобулиновых препаратах

Для комплексного лечения стафилококковой инфекции применяют иммуноглобулины нормальный или противостафилококковый, иммуноспецифическую плазму, эффективность которых зависит от концентрации антиальфа-стафилолизина. Показатель определяют в готовых иммуноглобулиновых препаратах и в плазме, используемой для их получения. В ходе производственного процесса также важно оценивать специфическую активность осадка II+III. Существующая методика определения антиальфа-стафилолизина предназначена для контроля качества плазмы человека для фракционирования, иммуноглобулинов человека нормального и специфического. Информация о ее применении для тестирования осадка II+III отсутствует. Актуальной задачей является повышение точности и расширение области применения методики определения антиальфа-стафилолизина для тестирования фракции II+III. Цель работы состояла в модификации методики определения антиальфа-стафилолизина в плазме человека для фракционирования, осадке II+III и иммуноглобулиновых препаратах. Специфическую активность оценивали в соответствии с ОФС.1.8.2.0008.15. В ходе модификации определен диапазон значений оптической плотности при установлении лимита гемолитического действия токсина. Подобраны условия анализа осадка II+III. Предложена схема разведения образцов с дискретностью 1 МЕ/мл. Доказана специфичность выявления антител, подтверждены сходимость, линейность и правильность модифицированной методики. Модификация методики расширила область ее применения за счет тестирования осадка II+III, повысила точность оценки путем снижения дискретности определения и исключения субъективности визуальной оценки при определении лимита гемолитического действия токсина. Подтверждены пригодность модифицированной методики для контроля качества сырья и готовой продукции.

1. Абаев И.В., Скрябин Ю.П., Коробова О.В. и др. Сравнение гемолитической активности и генов гемолитических токсинов клинических штаммов Staphylococcus aureus, изолированных на территории РФ. Клиническая лабораторная диагностика. 2019;64(5):294–298. DOI: 10.18821/0869-2084-2019-64-5-294-298.

2. Абакумова Т.В., Генинг Т.П., Михайлова Н.Л. и др. Физиология крови. Уч. пособ. к практическим занятиям по нормальной физиологии для студентов медицинского факультета. Ульяновск: УлГУ, 2017:58.

3. Буйлова И.А., Савкина М.В., Саяпина Л.В. и др. Оценка современного состояния фармацевтической разработки противостафилококковых профилактических препаратов. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2024;101(4):560–572. DOI: 10.36233/0372-9311-512.

4. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1998:459.

5. Инструкция по медицинскому применению препарата «Анатоксин стафилококковый адсорбированный».

6. Николаева И.В., Анохин В.А. Стафилококковые инфекции в педиатрии. Практическая медицина. 2010;1(40):24–27.

7. Общая фармакопейная статья ОФС.1.8.2.0008.15 «Определение содержания антиальфастафилолизина (специфических антител) в лекарственных препаратах из сыворотки крови человека и животных». Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIV изд. 2018;2:3183–3192.

8. Общая фармакопейная статья ОФС.1.1.0012.15 «Валидация аналитических методик». Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIV изд. 2018;1:276–288. [Obshhaya farmacopejnaya statya OFS.1.1.0012.15 “Validaciya analiticheskikh metidic”

9. Скрипай Л.А., Вильянинов В.И., Бельгесов Н.В. Применение иммунной плазмы при лечении пациентов с бактериальными инфекциями и иммуносупрессией. Вестник гематологии. 2022;18(1):56.

10. Фармакопейная статья ФС.3.3.2.0007.15 «Иммуноглобулин человека нормальный». Государственная Фармакопея Российской Федерации.XIV изд. 2018;2: 5758–5763. [Farmacopejnaya statya FS.3.3.2.0007.15 “Immunoglobulin cheloveka normalnyj”

11. Фармакопейная статья ФС.3.3.2.0009.19 «Иммуноглобулин человека противостафилококковый». Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIV изд. 2018;2:5771-5775.

12. Clegg J., Soldaini E., McLoughlin R.M., et al. Staphylococcus aureus vaccine research and development: the past, present and future, including novel therapeutic strategies. Frontiers in Immunology. 2021;12:705360. DOI: 10.3389/fimmu.2021.705360.

13. Francois B., Barraud O., Jafri H.S. Antibody-based therapy to combat Staphylococcus aureus infections. Clinical Microbiology and Infection. 2017;23:219– 221. DOI: 10.1016/j.cmi.2017.02.035.

14. Kelly J. Immunotherapy against antibiotic-resistant bacteria: the Russian experience with an antistaphylococcal hyperimmune plasma and immunoglobulin. Microbes and infection. 2000;2:1383–1392. DOI: 10.1016/S1286-4579(00)01292-2.